Méthode scientifique de quantification du NMN dans des échantillons biologiques
1. Présentation
Supplémentation de nicotinamide mononucléotide (NMN) pour réguler à la hausse le niveau de nicotinamide adénine dinucléotide (NAD+) a été révélé comme une intervention anti-âge prometteuse. Cependant, il reste très difficile de quantifier avec précision les intermédiaires du NAD+, NMN en particulier. Cette étude vise à introduire une nouvelle méthode, la méthodologie LC-MS/MS médiée par deux isotopes (dimeLC-MS/MS), pour la quantification précise de NMN dans des échantillons biologiques.
2. Facteurs affectant la détection précise du NMN
Le NMN est difficile à détecter avec précision en raison de sa vulnérabilité à la dégradation enzymatique, à la conversion dans le traitement des échantillons, à ses comportements complexes dans différentes conditions de colonne et d’extraction, ainsi qu’à l’effet de matrice.
Plus précisément, le NMN a les propriétés d’une polarité élevée et d’une faible volatilité, ce qui est facile à dissoudre dans l’eau mais difficile à dissoudre dans les solvants organiques. Ces propriétés limitent considérablement l’application de nombreuses méthodes d’analyse quantitative conventionnelles.
BÉchantillons iologiques commele sang transporte des activités importantes de CD38 et CD73 (ecto-5’nucléotidase), qui pourraient tous deux utiliser le NMN comme substrat.
Le comportement du NMN dans la colonne est très complexe, probablement en raison de la nature bipartite de ses charges, de sorte que de subtiles différences dans l’extraction et les conditions de la colonne affectent considérablement la détection fiable et précise du NMN.
3. Stratégies d’adaptation dimeLC-MS/MSRéduire l’impact des facteurs d’impact
Pour éviter l’interférence des facteurs mentionnés ci-dessus, une colonne prototype NMN-2 est appliquée. Cette colonne contient des particules de silice de haute pureté à base de C18 qui sont plus capables de lier des composés hydrophiles que des particules de carbone, améliorant ainsi la capacité de séparation.
L’acide perchlorique (PCA) est utilisé car il peut extraire efficacement le NAD+ et le NMN d’échantillons biologiques tels que le plasma avec des pertes minimales.
Pour tenir compte des effets de matrice, une quantité fixe (1 μM) de chaque composé isotopique est ajoutée aux échantillons biologiques avant l’extraction de l’ACP.
4. L’avantagesde dimeLC-MS/MS
Les étalons NMN isotopiques doubles, NMN (M + 14) et NMN (M + 5), dans la méthodologie LC-MS/MS, peuvent suivre avec précision le devenir des NMN pendant le traitement des échantillons, ce qui augmente considérablement la précision et la fiabilité de la mesure des NMN dans les échantillons biologiques. De plus, dimeLC-MS/MS permet d’évaluer l’efficacité d’extraction et les concentrations absolues de NMN dans différents types d’échantillons biologiques.
5. En conclusion
Ièmeestnouveau LC-MS/MS-Une méthodologie basée sur des normes isotopiques doubles du NMN permet de mesurer avec précision et fiabilité le NMN dans les échantillons biologiques.Il peut être utilisé pour de futures études sur l’absorption de NMN.
6. Référence
Unno, Junya et al. « Quantification absolue du mononucléotide de nicotinamide dans des échantillons biologiques par chromatographie en phase liquide-spectrométrie de masse en tandem à médiation isotopique double (dimeLC-MS/MS). » NPJ Aging Vol. 10,1 2. 2 janv. 2024, doi :10.1038/s41514-023-00133-1
Pourquoi choisir BONTAC?
BONTAC est le chef de file de la NMN industrie. Nous disposons de la première technologie de catalyse enzymatique complète en Chine et sommes devenus la principale entreprise de produits coenzymes largement utilisés dans l’industrie de la santé, la médecine et la beauté, l’agriculture verte, la biomédecine et d’autres domaines. Notamment, BONTAC est NMN fournisseur de matières premières de la célèbre équipe de David Sinclair à l’Université de Harvard. Nos services et produits sont dignes de confiance. En outre BONTAC dispose d’un centre de recherche indépendant sur la technologie de l’ingénierie des coenzymes au niveau provincial en Chine et d’usines propres, où la pureté et la stabilité des produits peuvent être assurées.
Démenti
Ièmeest l’article estfondé sur la référence dans leRevue académique. Les informations pertinentes sont les suivantes : fournir à des fins de partage et d’apprentissage uniquement, et ne représente aucun avis médical. S’il y a une infraction, veuillez contactL’auteur pourDELETion. Les opinions exprimées dans cet article ne représentent pas la position de BONTAC.