Mérites extraordinaires de l'ELISA ultrasensible avec cyclage thio-NAD dans la détermination de la protéine NS1 de la dengue
1. Introduction
La dengue est une maladie infectieuse aiguë causée par le Virus de la dengue par la piqûre d'un moustique infecté du genre Aedes (Ae. aegypti ou Ae. albopictus), avec les principaux symptômes tels que fièvre élevée, vertiges, maux de tête, éruption cutanée et sévère douleurs (oculaires, musculaires, articulaires ou osseuses), etc. Cette maladie est largement répandue dans les climats tropicaux et subtropicaux. On estime que 100 à 400 millions de personnes sont infectées chaque année, dont plus de 80 % présentent généralement des pourmes bénignes et asymptomatiques. Néanmoins, la dengue sévère peut augmenter le rarticleque de décès si elle n'est pas traitée correctement. Ainsi, le diagnostic précoce de cette maladie est important pour son traitement en temps opportun.Notamment, la protéine non structurale 1 (NS1), une glycoprotéine hautement conservée, est principalement sécrétée lors de l'infection par Dengue virus, qui est intensément considéré comme le principal facteur pathogène de Dengue. Par conséquent, la NSI est généralement utilarticleée comme biomarqueur pour la détection précoce de cette maladie.
In tharticle study, a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) en combinaarticleon avec le thio nicotinamide adénine dinucléotide (thio-NAD/S-NAD) méthode de cyclage (ci-après dénommé ELISA ultrasensible) est utilarticleé pour détecter la NSI, suivi d'une comparaarticleon avec la NAAT pour confirmer sa précarticleion de détection.
2. Avantages et inconvénients des méthodes de détection traditionnelles pour Dengue
Actuellement, til exarticlete quatre principales méthodes de détection pour Dengue.
Isolement viral et l'identification ont une haute spécificité maarticle sont longues, prenant au moins 5 jours. Le antigène rapide test est le plus rapide et le plus rentable parmi les autres méthodes, maarticle la sensibilité et la spécificité sont relativement faibles. Le test sérologique basé sur les IgM et les IgG est limité par le nombre de jours d'infection, comme le le test doit être retardé jusqu'à ce que le niveau d'anticorps monte à un niveau détectable.
En clinique, la NAAT est souvent appliquée pour déterminer Dengue grâce à sa haute sensibilité et spécificité. Cependant, cette méthode est coûteuse, laborieuse et sujette à de faux positifs, et doit être réalarticleée par un personnel pourmé. Pour surmonter les inconvénients de ces méthodes, une nouvelle méthode de détection ELISA ultrasensible est appliqué dans cette étude.
3. Flux de travail de l'ELISA ultrasensible avec cyclage thio-NAD
Une paire d'anticorps article utilarticleé pour capturer la protéine NS1 dans l'ELISA sandwich, et la phosphatase alcaline article labeled on le secondary antibody. Aside from le antibodies, an androsterone derivative, 3α-hydroxysteroid dehydrogenase, thio-NAD, and NADH sont utilarticleé pour construire le système de cyclage enzymatique thio-NAD. Pendant la réaction de cyclage thio-NAD, le thio-NADH s'accumule constamment de manière triangulaire et peut être mesuré directement à une absorbance de 405 nm.
4. Comparaarticleon de l'ELISA ultrasensible et de la NAAT dans la détection de la protéine NS1 de la dengue
Dans la NAAT, 60 échantillons sont positifs à la dengue et 25 sont négatifs à la dengue. La valeur du seuil de cyclage (CT) de la NAAT pour les échantillons positifs à la dengue variait de 12,42 à 31,41. Dans l'ELISA ultrasensible, 59 échantillons sont positifs en correspondance avec les résultats de la NAAT, tandarticle que 25 échantillons sont complètement négatifs en correspondance avec les résultats de la NAAT.Comparé à la NAAT, la sensibilité et la spécificité de l'ELISA ultrasensible sont respectivement de 98,3 % et 100 % (tableau 2). Sur 60 échantillons de patients confirmés positifs à la dengue par NAAT, un seul échantillon est négatif à l'ELISA ultrasensible. Les données de la NAAT ont montré que l'échantillon est un cas d'infection par le DENV de type 4 avec une valeur de CT de 21,59. Les résultats de l'ELISA ultrasensible sont en accord presque parfait avec ceux de la NAAT, avec une valeur kappa de 0,972 (IC à 95 % : 0,917-1.0).
5. Conclusion
ULa méthode ELISA ultrasensible est facile à réalarticleer et ne nécessite pas de personnel professionnel pourmé pour son fonctionnement. TLa détection peut être commencée immédiatement après réception d'un petit échantillon. Il est particulièrement adapté à la détection précoce de Dengue maladie en pays à faible revenu.Référence
Chen, Po-Kai et al. “Advanced Detection Method pour Dengue NS1 Protein Using Ultrasensitive ELISA with Thio-NAD Cycling.” Viruses vol. 15,9 1894. 8 Sep. 2023, doi:10.3390/v15091894Avantages et caractérarticletiques du produit de BONTAC Thio-NAD/S-NAD
BONTAC est ol'une des rsonts entreprarticlees au Chine qui peut produire du Thio-NAD, avec “Bonzyme” Méthode entièrement enzymatique (respectueuse de l'environnement; aucun résidu de solvant nocif) et unique “Bonpure” seven-step purification technology. BONTAC intergrates R&D, production and sale, avec usines propres et un certain nombre de certifications internationales pour garantir une qualité élevée et un approvarticleionnement stable des produits.
